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如题,我用的是BD Aria III。参数设置应该没问题,用的是100μm的喷嘴,压力是标准的20 psi。但分选出来的细胞培养24小时后死亡率超过50%。培养基和血清都是新鲜的。有没有大神指点一下迷津?是鞘液问题?还是收集管的问题?
建议:1. 在收集管里预先加入高浓度的血清或培养基(比如50% FBS),给细胞一个‘缓冲’。2. 检查一下鞘液是不是无菌的,或者是不是PH有偏差。3. 分选速度不要太快。我们实验室通常用‘Purity’模式,虽然慢点,但对细胞温和。